STZ诱导的糖尿病小鼠及进高脂高糖食小鼠肝脏清道夫受体B1表达的改变

目的  研究STZ诱导的糖尿病小鼠及进高脂高糖食小鼠脂质代谢及肝脏清道夫受体B1表达的改变

方法  1.动物模型的制备 正常对照组(N组):未经处理的6~8周龄的C57BL/6J小鼠,喂以正常 鼠喂养16周。糖尿病组:4周龄的C57BL/6J小鼠腹腔注射STZ(50mg/kg,PH4.4,无菌柠檬 酸 缓冲液稀释,每天腹腔注射一次,连续5天),开始注射4周后非空腹血糖高于15mmol/L认为 糖尿病模型制备成功,喂以正常鼠食,共10只,喂养16周。进高糖高脂食组:高糖高脂食含 35.5%脂肪(占总热量的58%,主要是猪油)、36.6%碳水化合物(主要是蔗糖)。未经处 理的6~8周龄的C57BL/6J小鼠,喂以高糖高脂食16周,共10只。 2.各组用各种饮食喂养16周,然后测各指标。 ①应用美国NORLAND XR-36双能X线骨密度仪测定小鼠腹部瘦肉及脂肪量。 ②测定血脂、血清胰岛素(INS)及空腹血糖(FBG) ③测定肝脏重量和脂质含量:将动物肝脏洗尽血迹,测定肝重。取少量剪成小块,置110℃ 烘至恒重,精确称取干燥后的肝脏。磨成细粉,加氯仿:甲醛(2:1,V/V),抽提定容, 再按上述测定血清脂质的方法测脂质含量。 ④测定肝脏SR-B1的表达:取-70℃保存的各组动物肝组织100mg,提取细胞膜蛋白,经SDS- 聚丙酰胺凝胶电泳,采用western blotting方法用抗小鼠的SR-B1多克隆抗体(购自美国Nov us生物工程公司)测定小鼠肝脏的SR-B1蛋白水平。

结果  ①进高糖高脂食小鼠出现血糖升高、血清INS升高以及向心性肥胖,可作为研究2型糖尿病 的动物模型; ②进高脂高糖食小鼠血清TC高于正常,STZ诱导的糖尿病小鼠血清HDL低于正常,TG高于正常; ③进高脂高糖食小鼠肝脏中TG及TC均增高,肝脏重量增加。STZ诱导糖尿病动物肝脏亦增大,但其中TC低于正常动物,TG高于正常动物; ④100mg肝脏的SR-B1蛋白表达量进高脂高糖食小鼠最高,其次是STZ诱导的糖尿病小鼠,最 低者为正常食小鼠。

结论  ①1型糖尿病和2型糖尿病小鼠均存在脂质异常; ②2型糖尿病小鼠肝脏TC和TG显著高于正常动物; ③相同重量肝脏的SR-B1蛋白表达量2型糖尿病小鼠最高,其次是STZ诱导的糖尿病小鼠,最低者为正常食小鼠。对肝脏重量进行调节后1型糖尿病小鼠高于2型糖尿病小鼠。


    2005/3/14 17:35:39    
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